耗材專區 | 應用EZsep™HLB固相萃取柱（zhù）建立化（huà）妝品中丙酸氯（lǜ）倍他（tā）索的（de）檢測方法

前言

丙酸氯倍他索是一種（zhǒng）抗炎皮質類固醇（chún），屬於糖皮質激素中的一種，具有較（jiào）強的抗炎、抗瘙癢和毛細管收縮作（zuò）用，因此很多三無（wú）化妝品可能會（huì）違規添加糖皮質激素，使用初期由於強大的抗炎功能，使皮膚呈現出一種光滑潔白吹彈可（kě）破的狀態，但長時間使用，就開始出現（xiàn）紅血絲（sī）、爆痘，皮膚敏感等問題，繼續使用會使皮膚情況越來越糟糕，停用皮膚情況更（gèng）糟糕，終隻能求醫慢慢來調整。

本文參照《GB/T 24800.2-2009 化妝品中四十一種糖皮質激素的測定》，利用（yòng）EZsep™HLB固相萃取柱（60mg/3mL，貨號：PZ12602）對化妝（zhuāng）品樣品進行淨化，再通過高效液相色譜串聯質譜儀進行檢測，建立了化妝品中丙酸氯倍他索的檢測方法，此（cǐ）方法的回收率及（jí）平行性良好，適合化妝品中丙酸氯（lǜ）倍他索的檢測。

1、實驗過程（chéng）

1.1 儀器與試劑  

SPE1000 全自動固相萃取係統，北京.17c嫩嫩草色视频蜜 %A儀器股份有限公（gōng）司；

4500質譜係統，SCIEX公司；

E.T.氮（dàn）吹濃（nóng）縮儀，貨號：C020017，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司；

EZsep™HLB固相萃取柱（60mg/3mL，貨號：PZ12602），北（běi）京（jīng）萊伯（bó）帕茲檢測科（kē）技有（yǒu）限公司；

離心（xīn）機，H1850，湖（hú）南湘儀實驗室（shì）儀器開（kāi）發有限公司；

乙腈（色譜純（chún）），購（gòu）自賽默飛世爾科（kē）技（中（zhōng）國）有限公司（sī）；

甲醇（色譜純），購自賽默飛世爾科技（中國）有限（xiàn）公司。

1.2 工（gōng）作液配製

丙（bǐng）酸氯倍他索標準儲備液（yè）：100ug/mL，溶劑為甲醇，購自壇（tán）墨質檢標準物質中心；

丙酸氯倍他索標準工作液（yè）：取100μL的標準儲備液於10mL的容量瓶中，用（yòng）40%乙腈水溶液定容，得到濃度為1.0μg/mL的標樣工作液；

移取1.0μg/mL的苯（běn）並（a）芘標準工作液0.05、0.1、0.2、0.4、0.8mL，分別置於1mL容（róng）量瓶中，用（yòng）40%乙（yǐ）腈水溶液定容至刻度，得（dé）到濃度（dù）為0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.0μg/mL的標（biāo）準曲線。

1.3 實驗部分

1.3.1 樣品製備

準確稱取化妝品樣品0.2g（精確至0.01g）於15mL塑料離心管（guǎn）中，加入3mL飽和氯化鈉溶液，渦（wō）旋混勻使樣品分（fèn）散，準確加入2mL乙腈，充分渦旋提取（qǔ）2min，5000r/min離心10min，吸出上層清液於50mL離心管中，下層氯化鈉溶液用2mL乙腈重複提取1次，合並2次乙腈提（tí）取液，在提取液中準確加入（rù）40mL高純水，混勻，加入亞（yà）鐵氰化鉀溶液0.2mL，混勻，加入乙酸鋅溶液0.2mL，混勻，5000r/min離心（xīn）10min，轉移出上清液待淨化（huà）。

1.3.2 固相萃（cuì）取淨（jìng）化（huà）

EZsep™HLB固（gù）相萃取柱（60mg/3mL，貨號：PZ12602）依次用5mL甲（jiǎ）醇、10mL水活化，取1.3.1待淨化液上樣，上樣結束後用（yòng）6mL10%乙腈水溶液淋洗萃取柱，再（zài）用4mL甲醇洗脫萃取柱，收集全部洗脫液，然後於E.T.氮吹濃縮儀（貨號：C020017）40℃下（xià）氮氣吹幹（gàn），準確吸取4mL水渦旋複溶0.5min，過微孔濾膜後供LC-MS/MS測定。

1.3.3 LC-MS/MS儀器條件

色譜柱：Shim-pack Velox C18（2.7μm，2.1*100mm）；

檢測方式：多反應監測（MRM）；

流動相：A:0.1%乙（yǐ）酸水，B:0.1%乙酸乙腈（jīng）（梯度洗脫程序見表1）；

流速：0.3mL/min；

進樣量：1μL。

表1 梯度（dù）洗脫程序

2、實驗結果

2.1 加標回收率結果

表2 加標回收率結果

2.2 加液色譜圖

圖1 標液色（sè）譜圖

2.3 加標樣（yàng）品色譜圖

圖2 加標（biāo）樣品色譜圖

3、結論

本次實驗展示了使用EZsep™HLB固相萃取柱（60mg/3mL，貨號：PZ12602）對化妝品中丙酸氯倍他索進行淨化，通過高（gāo）效液相色譜串聯質譜儀進行測定（dìng），該方法的加標回收率在77.8%~83.3%之間，RSD為2.6%，能夠滿足標準要求。說明（míng）EZsep™HLB固相（xiàng）萃（cuì）取柱（60mg/3mL，貨（huò）號：PZ12602）能很好的完成方法中的淨化工作，並且（qiě）結果穩定、可靠。

4、參考文獻

《GB/T 24800.2-2009 化妝（zhuāng）品中四十一（yī）種糖皮質激素的（de）測定》