耗材專區 | 肽段脫鹽耗材合集
更新時間:2024-12-27 點(diǎn)擊次數:2964
2019年初,萊伯泰(tài)科(kē)從3M公司購得Empore™品(pǐn)牌所有資產和技術工藝(yì)。為了滿足生命科學領域的應用需求,我們基於Empore™固相(xiàng)萃取膜(mó)技術,開發出多款用於蛋白質組學領域樣品前處理的肽段脫鹽產品,主(zhǔ)要有:Empore™固相萃(cuì)取盤、Empore™固相萃取(qǔ)吸頭、Empore™固相(xiàng)萃取(qǔ)柱、Empore™固相萃取離心管、Empore™固相萃取96孔板等。每(měi)一款產品都有多種填(tián)料類型(xíng)(C18、C8、SDB-XC、SDB-RPS、Anion、Cation等)、多種(zhǒng)規格,可以根據(jù)要處理的樣品種類、樣品量多少、所需的通量多少等因素去選擇。這些(xiē)耗材可以在LC-MS/MS分析(xī)之前純化多肽樣品或對多肽樣品做脫鹽處理。

(1)C18 StageTips(貨號:98-0604-1001-3EA)(2)Tips離心適配器(貨號:70-2019-1023-7)(3)離心管:1.5 mL或2.0 mL,低吸附(fù)洗脫液I:0.5%乙酸/60%乙腈水溶液(0.5%乙酸:60%乙(yǐ)腈:40%水)洗脫液II:0.5%乙酸/80%乙腈水溶液(0.5%乙(yǐ)酸(suān):80%乙(yǐ)腈:20%水)(1)樣品預處理:用200 µL淋洗/平衡液(0.5%乙酸水溶液)溶液多肽(tài)樣品,渦旋10~15 min,13000 r/min離心3~5 min;(2)將(jiāng)固相萃取吸頭(tóu)與適配器組裝在一起,然後整(zhěng)體放(fàng)入2 mL離心管中,並在這一步做好標記;(3)活化I:加載200 μL甲醇,4000 r/min離(lí)心1~2 min; (4)活化II:加載(zǎi)200 µL 80% ACN / 0.5% HAc, 4000 r/min離心1~2 min;(6)平衡:加(jiā)載200µL0.5%乙酸水溶(róng)液, 4000 r/min離心1~2 min; (8)上樣:在吸頭中加(jiā)載200 µL樣品,4000 r/min離心1~2 min,收集流出(chū)液並重新加載(zǎi)到吸頭上(shàng),再次離心,重複(fù)此步驟三次;根據含鹽量的不同,可調整離心(xīn)時間(2~5 min);(9)淋洗:加載200 µL0.5%乙酸水(shuǐ)溶液,4000 r/min離心2~3 min,重複此步驟2~3次;同樣,根據含鹽量的不同,可調整離心時間(2~4 min);(10)把吸頭和適配器放入新的(de)離心管中,重新做好標記;(11)洗脫I:加載200 µL 60% ACN / 0.5% HAc水(shuǐ)溶液,4000 r/min離心2min;(12)洗脫II: 加載200 µL 80% ACN / 0.5% HAc水溶液,4000 r/min離心2min,重複此步驟(zhòu)一次;(13)棄去吸頭,在幹冰上快速冷凍樣品(pǐn)(5~10 min),並進行真(zhēn)空幹(gàn)燥(zào)。