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耗材(cái)專區 | 應用S-X3不鏽鋼凝膠淨化柱檢測水產品中的雌激素

更新時間(jiān):2024-12-20       點擊次數:2912

前言


雌性激素(Estrogen),又稱女性激素,是一類主要的(de)女性(xìng)荷爾蒙。分為兩大類(均為類(lèi)固醇激素),即雌激(jī)素和(hé)孕激素。雌性激素是雌性脊椎動物的性激(jī)素,具有促進第二性征出現的(de)作用。過高的(de)雌性激素會對男性的生殖係統產生明顯影響,包括影響雄性激素的水平,導致內分(fèn)泌紊亂,同樣過高(gāo)的雌激素會增大女性(xìng)生病的概率,也會對青春期的孩子發(fā)育造成影響,故找到一(yī)種快捷高效的檢測方(fāng)法尤為重要。

本實驗參考《GB 31660.2-2019 食品安全(quán)國家標準(zhǔn) 水產品中辛基酚、壬基酚、雙酚A、已烯雌酚(fēn)、雌酮、17α-乙炔雌(cí)二醇、17β-雌二醇、雌三醇殘留量的測定(dìng) 氣相色譜-質譜法》,利用GPC1000全自動凝膠淨化係統對樣品提取(qǔ)液進行淨化,GC-MS進行檢測,方(fāng)法簡單、快捷(jié),能夠很好地(dì)去除幹擾物對目標物的(de)影響。



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實驗過程



1.1 儀器與試劑
GPC1000全自動凝膠淨化係統(北京.17c嫩嫩草色视频蜜 %A(kē)儀器股份有限公司);
MVP 全(quán)自動高通量真空平行濃縮儀,北京.17c嫩嫩草色视频蜜 %A儀器股(gǔ)份有限(xiàn)公司;
氣(qì)質聯用儀:7890B-5977B,安捷倫科(kē)技(jì)(中國)有限公司;
S-X3不鏽鋼凝膠淨(jìng)化(huà)柱(zhù)(20*300mm,貨號:Y020207015,北京萊伯帕茲檢測科技有限公司;
E.T.氮吹濃縮儀,貨號:C020017,北京萊伯帕茲檢測科(kē)技有限(xiàn)公司;
冷凍離心機,GL-20G-Ⅱ,上(shàng)海安亭科學儀器廠;
甲醇、環己烷(wán)、乙(yǐ)酸(suān)乙酯(色譜純),購自(zì)賽(sài)默(mò)飛世爾科技(中國)有限公司;
碳酸(suān)鈉(分析(xī)純),購自國藥集團化學試劑有限公司。

1.2 工作液配製
混合標準工作溶液:分別精密量取標(biāo)準儲備液適量(liàng)於10mL容量瓶中,甲醇定容,配成濃度為雙酚A50μg/L,已烯雌酚100μg/L,雌酮、17α-乙炔雌二醇、17β-雌二(èr)醇、雌三醇200μg/L的混合標準工作液。
取混合(hé)標準工作溶液50μL、100μL、200μL、500μL、1000μL於1.5mL樣品瓶中,40℃氮吹至幹,按1.3.3方法衍生,製成雙酚A濃度均為2.5μg/L、5μg/L、10μg/L、25μg/L、50μg/L的梯度係列,已烯雌酚濃度均(jun1)為5μg/L、10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L的梯度係列,雌酮17a-乙炔雌二醇、17β-雌二醇、雌(cí)三醇(chún)濃度均(jun1)為10μg/L、20μg/L、40μg/L、100μg/L、200μg/L的梯度係列標準曲線。

1.3 實驗部分
1.3.1 樣品製備
將水產品樣品均質,稱取5.0g樣(yàng)品,加入3mL100g/L的碳酸鈉溶液,加入20mL乙酸乙酯,超聲15min,5000r/min離心4min,取上清液,加入10mL乙酸乙酯複提,合(hé)並上清液後,40℃旋蒸至近幹,加入8mL50%環己烷乙酸(suān)乙酯溶液複溶,混勻,待凝膠淨化處理;同(tóng)時(shí)做樣品空白。
1.3.2 凝膠淨化處理
按照下圖所示的方法進行GPC1000方法編輯,並加載方法到相(xiàng)應通道,進行樣品的凝膠淨化。收集洗脫液,40℃氮氣吹幹,待衍生。
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1.3.1 衍生化
在1.3.2中的濃縮瓶中加入200μL丙酮,加入(rù)30μL七氟丁(dīng)酸(suān)酐,用錫箔紙封(fēng)口,在35℃水浴中(zhōng)衍(yǎn)生1h,用正己烷定(dìng)容至1.0mL待測。
1.3.1 GC-MS檢測條件
色譜柱:HP-5MS 30m*0.25mm* 0.25μm;
進樣口(kǒu)溫度:250℃,流速:1mL/min;
不分流進樣,1min後分流60mL/min;
進樣量:1μL;
柱箱:120℃,保持2min,以15℃/min升至250℃,以5℃/min升至 300℃,保持5min;
溶劑延遲:8.5min;
離子源溫度:230℃;
四極杆溫度:150℃;
傳輸(shū)線溫(wēn)度:280℃。


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實驗結果



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表1 水產品中雌激素的回收率

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圖1 標準樣品色譜圖

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圖2 空白樣(yàng)品色譜圖

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圖3 加標(biāo)樣品色譜圖

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實(shí)驗結論



本次實驗(yàn)展示了一種(zhǒng)使用S-X3不鏽鋼凝膠淨化柱(20*300mm,貨號:Y020207015,對水產品中的雌激素測定的淨化,回收率在70.5%~110.5%之間,重現性RSD為3.9-8.1%,回收率高、重現性良好,說明S-X3不鏽鋼(gāng)凝膠淨化柱,適用於水產品中(zhōng)的雌激素測定的淨化,並且結果穩定、可靠(kào)

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參考文(wén)獻



[1] GB 31660.2-2019 食品安全國家標準 水產品中辛基(jī)酚、壬基酚、雙酚(fēn)A、已烯雌酚、雌酮、17α-乙炔(quē)雌二醇、17β-雌二醇、雌三醇(chún)殘留量的測定 氣相色譜-質譜法。



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