耗材專區 EZsepTM MAX固相萃取柱（zhù）檢測動物性食品中碘醚柳胺殘留量

前（qián）言：

碘醚柳胺是鹵化水楊酰苯（běn）胺類殺（shā）吸蟲藥，可以（yǐ）抑（yì）製蟲體線粒體的磷酸化過程，從而阻止蟲體內三磷酸腺甙Chemicalbook（ATP）的合成，導致蟲體能量（liàng）代（dài）謝（xiè）的活力迅（xùn）速減弱而死亡。它與血液蛋白有很強的親和力，所以藥效在血液中有較長的持續時（shí）間，造成藥物在動物體內富集，而人類食用這些肉類會使獸藥殘留進入人體，從而影響身體健康。

本文參照《動物性（xìng）食品中碘醚柳胺殘留量（liàng）的測定（dìng） 液相色（sè）譜-串聯質譜法（征求意見稿）》，利用EZsep^TMMAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號：PZ12802）進行淨化，再用（yòng）高效液相色譜串聯質譜儀進行檢測，建立了一種對動物性食品中碘醚柳胺殘留量的分析方法。

關鍵（jiàn）詞：

動物性（xìng）食品，碘醚柳胺，固相（xiàng）萃取

1， 實驗過程

1.1 儀器與試（shì）劑  

MPREP-SPE08手動（dòng）固相萃取裝置，貨號：PZ0008，北京萊伯帕（pà）茲檢測科（kē）技有（yǒu）限公司；

E.T.氮吹濃縮儀，貨號（hào）：C020017，北京萊（lái）伯帕茲檢測科技有（yǒu）限公司；

4500質（zhì）譜係統，SCIEX公司；

EZsep^TMMAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號：PZ12802），北京萊伯帕茲檢測科技有限（xiàn）公司；

冷凍離心機，GL-20G-Ⅱ，上海（hǎi）安亭科學儀器廠  ；  

甲醇（chún）（色（sè）譜純），購自賽默飛世爾科技（中國（guó））有（yǒu）限公司；

乙腈（色譜純），購自賽（sài）默飛世爾科技（中（zhōng）國）有限公司；

甲酸，氨水，三乙胺等化學品（pǐn）均為分析純或以上，購自國藥集團化學試劑有限（xiàn）公司。

1.1 工（gōng）作液配（pèi）製

碘醚柳胺標準物（wù）質：100mg/瓶，購自（zì）壇墨質檢標準物質中心（xīn） 。

碘醚柳胺標準儲備液：取（qǔ）碘醚柳胺標準品適（shì）量(相當於（yú）有效成分約10mg)，精密稱定，用乙腈稀釋至10mL容量瓶（píng）中，配製成濃（nóng）度為1000μg/mL的碘醚柳（liǔ）胺標準儲備液。

碘醚柳（liǔ）胺標準中間液:移取碘醚柳胺標準儲備液0.1mL，用乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配製成濃（nóng）度為10μg/mL的碘醚柳胺標（biāo）準中間液。

碘醚柳胺標準使用（yòng）液:碘醚柳胺標準中間液0.1mL，用（yòng）乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配製成濃度為0.1μg/mL的碘醚柳胺標準使用液。

分別移（yí）取0.1μg/mL的碘醚柳胺標準使用液0.02、0.1、0.5、2.0、5.0mL分別置於（yú）10mL容量瓶中用甲醇定容至刻度，標準（zhǔn）濃度為0.2 μg/L、1μg/L、5μg/L、20μg/L、50μg/L。

1.3 實驗部分

1.3.1 樣品製備

取羊（yáng）腰試樣2g，置於50 mL聚丙烯離心管中，加10.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液均質5min,超聲提取10 min,8000 r/min離（lí）心5 min,收集上清液（yè）至另一50 mL離心（xīn）管中殘渣中（zhōng）加（jiā）10.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液，重複提取一次，合並兩次上清液，混（hún）勻，取提取液（yè）5.0 mL備（bèi）用（yòng）待（dài）淨化。

1.3.2 固相萃取淨化

EZsep^TMMAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨（huò）號：PZ12802）用5mL乙腈進行（háng）活化，取1.3.1待淨化液上樣，上樣結束後用（yòng）5mL乙腈淋（lín）洗（xǐ）萃取柱，再用5mL 5%甲（jiǎ）酸乙腈洗脫萃（cuì）取柱（zhù），收（shōu）集洗脫液，以E.T.氮吹濃縮儀，45℃氮氣濃縮至近幹，加2.0 mL甲醇，渦旋混勻過微孔濾膜後供LC-MS/MS測定。

1.3.3 LC-MS/MS儀器條件

色譜（pǔ）柱：Shim-pack Velox C18（2.7μm，2.1*100mm）；

檢測方式：多反應監測（MRM）；

流動相：A:0.1%氨水水溶液 B: 甲醇；

流速：0.3mL/min；

進樣量：5μL。

表（biǎo）1流動相梯度洗脫表（biǎo）

1， 實驗結果

圖1 標液色譜圖

圖2碘醚柳胺標準曲線圖

1， 結論

本次實驗展示了使用EZsep^TMMAX固相（xiàng）萃取柱（60 mg/3mL，貨號：PZ12802）對動物性食品中碘醚柳胺殘留量進行淨（jìng）化，通過高效液相色譜串聯質譜（pǔ）進行測定，其加標回收率在85.0%~93.3%之間，RSD在3.6%，能夠滿足標準要求。說明EZsep^TMMAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨（huò）號：PZ12802）能很好的完成方法（fǎ）中的淨化工作（zuò），並且結（jié）果穩定、可靠。

2， 參考文獻（xiàn）

1. 《動物（wù）性（xìng）食品中碘醚柳胺殘留量的測定 液相色譜-串（chuàn）聯質譜法（征求意見稿）》

表 1   加標回收率結果（guǒ）