1升（shēng）汙水僅需10分鍾！Empore™膜式固相萃取在“汙水驗毒（dú）”中的應用

摘（zhāi）要

對（duì）比傳統填料固（gù）相萃取柱同CDS公司EmporeTM膜式固相萃（cuì）取柱（MPC）和EZdisk 濾器式固相萃（cuì）取盤（MPC），應用（yòng）於從汙水中（zhōng）提取10種（zhǒng）毒品及其（qí）代謝（xiè）物。發現相較傳統填料固相萃取柱，EmporeTM膜式固相萃取產品所需洗（xǐ）脫體（tǐ）積更少，適（shì）用流速範圍更寬，提取效率（lǜ）更高（gāo）。

前言

毒品問（wèn）題一直是社會高度關（guān）注的焦點，汙水中毒品及其代謝物的檢測不僅能夠反映當（dāng）地的毒品濫用情況（kuàng），更能反映某個特定區域禁毒工作效果，警方通過對汙水（shuǐ）中（zhōng）毒品檢測數據的客觀分析，構（gòu）建毒情形勢監測體係（xì），有（yǒu）利於把控毒品發展態勢，全麵科學分析毒品濫用情況、確定毒情泛濫區域，進而強有力地（dì）推進毒毒工作[1]。

美國CDS公司EmporeTM係列（liè）膜（mó）式固相萃取產品，具有上樣速度快、重現（xiàn）性高（gāo）、填料流失量低、洗脫體積少等特點（diǎn）。

通過實驗對比了（le）傳（chuán）統填料固相萃取柱同CDS公司EmporeTM膜式固相萃（cuì）取柱（MPC，7mm/3mL）和EZdisk 濾器式固相（xiàng）萃取盤（MPC，13mm）應用於（yú）汙水樣品中毒品及其代謝物的提取（qǔ）並用LC-MS/MS分析[2,3,4]。

1. 實驗過程

1.1 儀器與試劑

1.1.1 SPE1000全自動固相萃取係統（萊（lái）伯泰科）；

1.1.2 Extrapid固相萃取裝置（北京萊伯帕茲檢測科（kē）技有（yǒu）限（xiàn）公司（sī））；

1.1.3 M64高通（tōng）量平行（háng）濃縮儀（.17c嫩嫩草色视频蜜 %A）；

1.1.4 SCIEX Exion LC™液相係統（tǒng）+Triple Quad™4500質譜係統（SCIEX）；

1.1.5 甲醇（色譜純（chún），Fischer ）；

1.1.6 乙腈（色譜純，Fischer ）；

1.1.7 甲酸；

1.1.8 濃氨水；

1.1.9 濃鹽酸；

1.1.10 酸化水（shuǐ）：用（yòng）濃鹽酸調節pH=2的水；

1.1.11 5%氨水甲醇溶液：量取氨水5mL，加甲醇稀釋（shì）至100mL，混勻；

1.1.12 玻璃纖維濾膜：1.2μm；

1.1.13 200μL內襯管；

1.1.14 微（wēi）孔濾膜 0.22μm，PTFE ；

1.1.15傳統散裝填料固相萃取柱（MCX, 60mg/3mL，北京萊伯帕茲檢測科技（jì）有限公司）；

1.1.15 EmporeTM膜式固相（xiàng）萃取柱（MPC，7mm/3mL，98-0604-0181-7 EA, 美國CDS Analytical）；

1.1.16 EZdisk 濾器式固（gù）相萃取盤（pán）（MPC,13mm，98-0706-0120-1 EA, 北京萊伯帕茲檢測科技有限公司）。

1.2 工（gōng）作液配置

1.2.1 10種毒品混標標準溶液（甲基苯丙胺、苯丙胺、嗎啡、O6-單乙酰嗎啡、可（kě）卡因、苯甲酰安康寧、氯胺酮、去甲氯胺酮、MDMA、MDA, 均為1000ng/mL，溶劑為甲醇，購自壇墨質檢標準物質中心）

1.2.2 10種毒品混標標準工作溶液：25ng/mL，移取（qǔ）0.5mL 10種毒品混標標準溶液置（zhì）於20mL容量瓶中，用0.1%甲（jiǎ）酸水定容。

1.2.3 10種毒（dú）品內標標準溶液：（甲基苯丙胺（àn）-D5、苯丙胺-D5、嗎啡-D3、O6-單乙酰嗎啡-D3、可卡因-D3、苯甲酰安康寧-D3、氯胺酮-D4、去（qù）甲氯胺酮-D4、MDMA-D5、MDA-D5, 均為1000ng/mL，溶劑為甲醇，購自壇墨質檢標準物質中心）

1.2.4 10種毒品內（nèi）標標準工作溶液：25ng/mL，移取（qǔ）0.25mL毒品內標（biāo）標準溶液置10mL容量瓶，用甲醇定容。

1.3 實驗（yàn）部分

1.3.1 樣（yàng）品（pǐn）製備

將汙水檢材樣品解凍並充分搖勻，以濃鹽酸調節pH值小於2，使用溶劑過濾器和玻璃纖維濾膜過（guò）濾，取濾液待分析用。在固相（xiàng）萃取之前，取50mL已過濾樣品加入100μL 10種毒品內標標準工作溶液（yè）（25ng/mL）混（hún）勻待淨化。

1.3.2 淨化與（yǔ）濃縮

EmporeTM膜式固相萃取柱、EZdisk 濾器式固相萃（cuì）取盤及傳統散裝填料固相萃取柱（MCX， 60mg/3mL，）依次以4mL甲醇、4mL酸性水進行活化，之後以2mL/min上樣，上樣結束後用4mL水、4mL甲醇淋洗萃取柱，在（zài）690mmHg真空狀（zhuàng）態下幹燥5min，後用2mL 5%氨水甲醇溶液（yè）進行洗脫（傳統（tǒng）散裝填料固相萃取柱（MCX 60mg/3mL）用5mL  5%氨水（shuǐ）甲醇溶液進行洗脫）。使用同一批（pī）次小柱（zhù），分別在（zài）流速5mL/min、10mL/min下，進（jìn）行對（duì）比實驗。

洗脫液經50℃氮吹至幹，然後（hòu）加入0.1%甲酸水溶液250μL複溶（róng），混勻後用（yòng）微（wēi）孔濾膜過濾，裝於200μL內襯管中，供儀器檢測。

1.3.3 標準曲線配置

取與檢材樣品等量的（de）純淨水，添加適量的10種毒品混標標準工作溶（róng）液，分別（bié）配製目標物的濃度為1ng/L、5ng/L、10ng/L、50ng/L、100ng/L、500ng/L溶液，與檢（jiǎn）材樣品平行，經1.3.1、1.3.2的方法進行（háng）處理（lǐ），供儀器檢測

1.3.4 LC-MS/MS分析（xī）

色譜（pǔ）柱：Shim-pack Velox C18（2.7μm，2.1*100mm）；

柱溫：40℃；

流動相：A: 0.1％甲酸（suān）水溶液；B:乙腈；

流速：0.3 mL/ min；

進樣（yàng）量：5μL；

表1 梯度（dù）洗脫程序

離子源（yuán）：ESI源，正離子模式；

離（lí）子（zǐ）源參數：

IS電（diàn）壓（yā）：5500V ；氣簾氣CUR:35psi；

霧化氣GS1:55 psi ；輔助氣GS2:60psi；

源溫度TEM:600 ℃。

2. 實驗結果

圖1 標準（zhǔn）樣品圖（tú）譜

圖2 加標樣品（pǐn）譜圖

3. 結果與討論

在本次（cì）實驗中，膜式固相萃取柱和濾器式固相萃取盤的10種毒品及其代（dài）謝物的平均加標回收率為（wéi）88.4%~112.5%，相對標準偏（piān）差RSD為0.9%-8.7%（表2），取得滿意效果,傳統式固相萃取柱的平均加標回收率為84.6%~131.3%，相（xiàng）對標準偏差RSD為1.6%-10.8%，除MDA回收率偏大外，其他物質均（jun1）滿足要求。但在同樣實驗條件下，膜式固相萃取產品可使用更小洗脫體（tǐ）積（2mL），有效縮（suō）短了濃縮時間。且在上（shàng）樣速度為10mL/min時，六次平行實驗RSD仍（réng）小於10.0%。

表 2 加標回收率（lǜ）和精密度（dù）匯（huì）總表

圖3 樣品洗脫體積對比（bǐ）表

4. 參考文（wén）獻

[1] Detection and Quantification of Ketamine HCl in Alcohol/Water Matrices using ESI-MSn and LC-ESI-MS, Justin Lygrisse, Martin Lapp, Kelsey Witherspoon and Michael Van Stipdonk, Proceedings of the 5th Annual GRASP Symposium, Wichita State University, 2009

[2] 向平（píng）, 施妍（yán）, 沈保華,等（děng）. 一種同時測定生活汙水（shuǐ）中11種毒品（pǐn）及其代謝物的分（fèn）析方法:, CN111426768A[P]. 2020.

[3] Xylazine, Ketamine and their Combination for Lumbar Epidural Analgesia in Water Buffalo Calves (Bubalus bubalis)，P. Singh, K. Pratap, Amarpal, P. Kinjavdekar et al. J. Vet. Med. A 53, 423–431 (2006)

[4] 汙水中新精神活性物質的分析方（fāng）法優化及驗證（zhèng）, 陳培培, 杜鵬, 周子雷. 環境科學, 2018, 39(8): 3736-3743.