重大突破：“植物蛋白質組學”樣（yàng）品製備新技（jì）術來了！

該樣品製備技術的核心原理其實很簡單：

• 甲醇固定：用甲醇（chún）將（jiāng）植物組織（如葉片、花（huā）粉）固定到E3或E4 Tips/Filter中的膜上，同（tóng）時細胞膜（mó）變得通透，細胞內（nèi）蛋白質凝固，這一步使得後續加入的還原（yuán）、烷基化、酶解試劑進入細胞內部；

• 濾膜上處理：在E3或E4 Tips/Filter中的（de）濾膜上完成蛋白質的還原、烷基化和酶解；

• 質譜檢測：酶解後的（de）肽段通過洗（xǐ）脫、脫（tuō）鹽後，即可（kě）進行LC-MS/MS分析，無需額外的複（fù）雜步驟。
  

整個流程實現了 “單容器操（cāo）作"，不僅省去了機械破碎細胞的過程（chéng），還將樣本處理時間從傳統的數小時縮短到24小時內（其（qí）中大部分是酶解的等待（dài）時間，實際操作時間僅需1-2小時）。

為了驗（yàn）證 “細胞內蛋白質組學" 樣本（běn）處理技術的優勢，研究團隊以（yǐ）擬南芥、本氏煙草、玉米、高粱等種（zhǒng）類植物為研究（jiū）對象，將其與傳統的SDS裂解、TFA裂解方法行了全麵對比。結果令人驚喜，新技術的表現遠超預期（qī）！

蛋白質鑒定深度（dù）更高、定量準確性和重複性（xìng）更好

在葉片樣本分析中（zhōng），OFIC樣本處理技術通（tōng）過單次LC-MS/MS分析，就能從（cóng）擬（nǐ）南芥葉片中（zhōng）鑒定出約9600種蛋白質（zhì），玉米葉片中鑒定出8600種蛋白質，本氏煙草葉片中更是鑒定（dìng）出12000種蛋白質——這樣的分析結果遠超傳（chuán）統SDS裂解方法（通常單次分析（xī）僅能（néng）鑒定出5000-7000種蛋白質）。

分析（xī）結果顯（xiǎn）示，OFIC技術的蛋白質組定量分析變異係數（CV）僅為15%左右，樣（yàng）本間的皮爾遜相關（guān）係數接近0.97，遠優於傳統SDS裂解方法（CV約20%，相關係數0.92）和TFA裂解方法（CV約30%，相關係數0.85）。這意（yì）味著新技術能更精（jīng）準地捕捉樣本（běn）間的蛋白（bái）質表達差異，為後續的（de）差異表達分析提供更可靠的數據基（jī）礎。

對於更難處理（lǐ）的花粉樣本，新方法同樣表現（xiàn）出色：僅需1/10朵本氏煙草花的花粉，或2朵擬南芥花的花粉，就能分別鑒定出8500種和（hé）6400種蛋白質，而（ér）傳統方（fāng）法往往需要（yào）大量花粉才能（néng）完成分析，且蛋白質鑒定數量不足5000種。

傳統方（fāng）法處理植物葉片通常需要至少100mg的新鮮組織，而OFIC新方法僅需（xū）1/4片葉片（約25mg）就能完成分析；對於花粉這類（lèi）微量樣本，新方法的優勢更為明顯——僅需微量花粉就能滿足實驗需求，解（jiě）決了珍稀樣本（běn）樣本量少難以分析的困難。

“細胞內蛋白質組學"樣本處理技（jì）術的出現，不僅解（jiě）決了傳統方法的諸多痛點（diǎn），還大大降（jiàng）低了蛋白（bái）質組學樣本處理的技術門檻。研究（jiū）團隊表示，這種方法還可應用於其他植物組織或其他類型蛋白質組學樣本。