耗材專（zhuān）區 EZsepTM MAX固相萃取柱（zhù）應用於牛（niú）奶中碘醚柳胺殘留量的檢測

本文參照《動物性食品中碘醚（mí）柳胺殘留量的測定 液相色譜-串聯質譜法（征求意見稿）》，利用EZsepTM MAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號：PZ12802）淨化（huà）樣（yàng）液，再通過高效液相色譜串聯質譜儀進行（háng）檢測，建立了一種對牛奶中碘醚柳胺殘留量進行分析的方法。

關鍵詞：

牛奶，碘（diǎn）醚柳胺，固相萃取

1 實驗過（guò）程

1.1儀器與試劑   

MPREP-SPE08手動固相萃取裝（zhuāng）置，貨號：PZ0008，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司；

E.T.氮吹濃縮儀，貨號：C020017，北京萊伯帕茲（zī）檢測（cè）科技有限（xiàn）公司；

4500質譜係統，SCIEX公司；

EZsepTM MAX固相萃取柱（zhù）（60 mg/3mL，貨號：PZ12802），北京（jīng）萊伯帕茲檢測科技有限公司；

冷凍離心機，GL-20G-Ⅱ，上海安亭科學儀器（qì）廠  ；  

甲醇（色譜純），購自賽默飛世爾科技（中國（guó））有限（xiàn）公司；

乙腈（jīng）（色譜純），購自賽默飛世爾科技（jì）（中國）有限公司；

甲酸、氨水、三乙胺等化學品均為分析純或以（yǐ）上規格，購自（zì）國藥集團化學試（shì）劑有限公司。

1.2   工作液配製

碘醚柳胺標準物質：100mg/瓶，購自壇墨質檢標準物質中心。

碘醚柳胺標準儲備液：取碘醚柳胺標準品適量（相當於有效成分約10mg），精密稱（chēng）取，用乙腈稀釋至10mL容量（liàng）瓶中，配製成濃（nóng）度為1000μg/mL的碘醚柳胺標準儲備液。

碘醚柳胺標準中間液：移取碘醚柳胺標準儲（chǔ）備液（yè）0.1mL，用乙（yǐ）腈稀釋至10mL容量瓶中（zhōng），配製成濃（nóng）度為（wéi）10μg/mL的碘醚柳胺標（biāo）準中間（jiān）液。

碘醚柳胺標準使用液：碘醚柳胺標準中間液0.1mL，用乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配製成濃（nóng）度為0.1μg/mL的碘醚柳胺標準使（shǐ）用液。

依次移取0.1μg/mL的碘醚柳（liǔ）胺標準使用液0.02、0.1、0.5、2.0、5.0mL，分別置於10mL容（róng）量瓶中用甲醇定容至刻度，得到濃度依次為0.2μg/L、1μg/L、5μg/L、20μg/L、50μg/L的標準係列工作液。

1.3 實驗部分（fèn）

1.3.1 樣品製備

 取牛奶試樣2g，置於50 mL聚丙烯（xī）離心管中，加10.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液超聲提取（qǔ）10 min，8000 r/min離心5 min，收集上清液至另一50 mL離心管中，向殘渣中加入8.0 mL 1%三乙胺乙腈（jīng）溶液，重複提取一次，合並兩次上清液，用乙腈定容至20 mL，混勻，待淨化。

1.3.2 固相萃取淨化（huà） 

EZsepTM MAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號：PZ12802）用5mL乙腈進（jìn）行活化，取1.3.1待淨化液5.0 mL上（shàng）樣，上樣結束後用5mL乙腈淋洗萃取柱（zhù），再用（yòng）5mL 5%甲（jiǎ）酸乙（yǐ）腈洗脫萃取柱，收集洗脫液，使用（yòng）E.T.氮吹濃縮儀在（zài）45℃下氮氣濃縮至近幹，加2.0 mL甲醇渦旋混勻，過微孔濾膜後供LC-MS/MS測定。

1.3.3 LC-MS/MS儀（yí）器條件

色譜柱：Kinetex Luna PFP（2.6μm，3*100mm）

檢測方式：多反應監測（MRM）；

流動相：A:0.1%氨水（shuǐ）水（shuǐ）溶液  B: 甲（jiǎ）醇

流速：0.3mL/min

進樣量：5μL

表1流動相梯度洗（xǐ）脫表

2 實驗（yàn）結（jié）果

圖1 標（biāo）液色（sè）譜圖

圖2 碘醚柳（liǔ）胺標準曲線

3 結論 

本（běn）實驗使（shǐ）用EZsepTM MAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號：PZ12802）對牛奶中碘醚柳胺進行淨化，通過高（gāo）效液相色譜串聯質譜儀進行測定，該方法的加標（biāo）回收率範圍89.6%~95.3%，RSD為2.3%，能夠滿足標準要求。也說明（míng）EZsepTM MAX固相萃取（qǔ）柱（60 mg/3mL，貨號：PZ12802）能很好的完成（chéng）方法中的淨（jìng）化（huà）工（gōng）作，結（jié）果穩定、可靠（kào）。

參考文獻

[1] 《動物性食品中碘醚（mí）柳胺殘留量的測定（dìng） 液相色譜-串聯質譜法（征求意見稿）》

表 2   加標回收率（lǜ）