耗材專（zhuān）區 | EZsep™WAX固相萃（cuì）取柱應用於肉製品中合成著（zhe）色劑的檢（jiǎn）測

前言

GB 5009.35-2023食品中合成著色（sè）劑的測定標準將於2024-03-06起實施，本次標準修訂在現有檢測方法的基礎上，擴充了能（néng）夠檢測的食品基質類型和著色劑種類，覆蓋了GB 2760-2014中規定的11種合成著色劑（jì）（分別為（wéi）檸檬黃、新紅、菜紅、藍、胭（yān）脂紅、日落黃、誘惑紅、亮藍、唾（tuò）咻黃、赤蘚紅和酸性紅（hóng）），以及允許添加的所有基質大類中的25種（zhǒng）典型基質。同時（shí）前處理方法也由聚酰胺粉變更為WAX混合型弱陰離子交換反相吸附或（huò）等效（xiào）固（gù）相萃（cuì）取柱。

本實驗參（cān）考標（biāo）準《GB 5009.35-2023 食品安全國家標準 食品中合（hé）成著色劑的測（cè）定》，使用EZsep™WAX固相萃取柱淨化樣品，再通（tōng）過E.T.氮（dàn）吹濃（nóng）縮儀濃（nóng）縮，高效液相色譜進行檢測，建（jiàn）立了肉（ròu）製（zhì）品中合成著（zhe）色劑的分析方法。

1、實驗（yàn）過程

1.1 儀器（qì）與（yǔ）試劑（jì）

LC-20AD液相色譜儀，島津（jīn）企業管理（中國）有限公司（sī）；

MPREP-SPE08手動（dòng）固相萃取裝置，貨號：PZ0008，北京萊伯帕茲檢測（cè）科技有限公司；

E.T.氮吹濃縮儀，貨號：C020017，北京（jīng）萊伯帕（pà）茲檢測科技有（yǒu）限公司；

EZsep™WAX固相萃取柱（150mg/6mL），貨號：PZ12103，北京萊伯帕（pà）茲檢測科技有限公（gōng）司；

冷凍離心機，GL-20G-Ⅱ，上海（hǎi）安亭科學儀（yí）器廠（chǎng）；

甲醇（色譜純），購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司；

甲酸，氨水，無（wú）水乙醇，乙酸銨，等化學（xué）品均為分析純或以上，購自國藥集團化學試劑有限公司；

水中（zhōng）11種色素混標，100μg/mL，壇墨質檢科技股份有限公司。

1.2 工作液配製

取色素混合標準溶液1mL，用水稀釋至10mL容（róng）量（liàng）瓶（píng）中，配製成濃度為10μg/mL的色素混標（biāo）中（zhōng）間液。

移取10μg/mL的色素混標中間液0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0mL，分別用水（shuǐ）稀釋至1.0mL容量瓶中，得到濃度依次為（wéi）0.2、0.5、1、2、5、10μg/mL的標準係列工（gōng）作液。

1.3 實驗部分

準確稱取試樣2.0g，置於50mL具塞離心管中，先加入20mL石油醚,渦旋1min，超聲提取10min，10000r/min離心5min，棄去（qù）上清液，加入25mL乙醇氨水溶液，50℃超（chāo）聲提取20min，10000r/min離心10min，取上清液置於50mL容量瓶中，每次加（jiā）入約5mL乙醇氨水溶液重複提（tí）取操作（zuò）四次，離心後合並上（shàng）清液於50mL容量瓶中，用乙醇氨水溶液定容至刻（kè）度即得提取液。準確吸取提取（qǔ）液10mL，50℃氮氣濃縮（suō）至3mL左右，分3次共加入10mL5%甲醇水溶液溶解，作為待淨化液，待淨化。

將EZsep™WAX固相萃取柱（150mg/6mL，貨（huò）號：PZ12103）依次用（yòng）6mL甲醇、6mL水活化後（hòu），取1.3.1待淨化液上樣，上樣結束後再依次用6mL2%甲酸水溶液、6mL甲醇（chún）淋洗固相萃取柱，之後用氮氣吹幹萃取柱2min，以6mL 2%氨化甲醇溶液洗脫並收集洗脫液，經E.T.氮吹（chuī）濃縮（suō）儀在（zài）50℃下氮（dàn）氣濃縮（suō）至近幹（gàn），再加0.2mL甲醇，用0.02mol/L乙酸銨稀釋至（zhì）2.0 mL，渦（wō）旋1min，PTFE微孔濾膜過濾，高效液（yè）相色譜測定。

1.4 LC分析（xī）

色譜柱：C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）

流動相：A：0.02mol/L乙酸銨（ǎn）溶液 B：甲（jiǎ）醇；

流速：1.0mL/min

檢（jiǎn）測波長：415nm、520nm、610nm

進樣量：10μL

表（biǎo）1 流動相梯度（dù）洗脫表

2、       實（shí）驗結（jié）果

表2 加標回收率結果（guǒ）

圖1 1.0μg/mL混標（biāo）色譜圖

圖2 樣品加標（biāo）色譜圖

圖3 空白樣品色譜圖

3、結論

本實驗使用EZsep™WAX固相萃取柱（150 mg/6mL，貨號：PZ12103，北京萊伯帕茲檢測科（kē）技有限（xiàn）公司）對肉製品中合成著（zhe）色劑進行淨化後測定，該方法的加標回收率在62.2%~95.0%之間，RSD在0.5%~3.9%之（zhī）間。準確性和精密度均滿足GB 5009.35-2023要求，且實（shí）驗方法穩定、可靠。

4、參考文獻

[1] GB 5009.35-2023 食品安全國家標準 食（shí）品中（zhōng）合成著色劑的（de）測定