解決方案 | 固相萃取（qǔ）-LC-MS/MS測定牛（niú）血清中的全氟化合物

前言

全氟和多氟烷基化合物（PFAS）由（yóu）數（shù）千種物質組成，由於其含有極其穩定的碳（tàn）氟鍵，使得此類物質（zhì）具有很強的化學穩定性、表麵活性、優良的（de）熱穩定性和疏水疏油性，被廣泛應用於工業生產和生活消（xiāo）費領域，PFOA、PFOS、PFHxA、PFHxS等都屬（shǔ）於PFAS。

PFAS被廣泛應用於日用品、食品包裝等產品，人們在日常生活中使用這（zhè）些包含PAFS的消費品從而接觸到該物質，大部分的（de）PFAS如PFOA和PFOS，不會在環境或人體內分（fèn）解，長（zhǎng）時間（jiān）在生（shēng）物（wù）體內存留，隨著時間的推移，人體會產生諸多健康問題。

本實驗參考《超高效液相色譜-四極杆/靜電場軌道肼高分（fèn）辨質譜法同時測（cè）定血清中12種全氟化合物》，利用.17c嫩嫩草色视频蜜 %ASPE 1000全（quán）自動固相萃取（qǔ）係（xì）統和M64高通量平行（háng）濃縮儀進行（háng）相關方法研究。

1、實驗部分

1.1儀器（qì）與試劑

SPE 1000全自動固相萃（cuì）取（qǔ）係統（tǒng），.17c嫩嫩草色视频蜜 %A

M64高通量平（píng）行濃縮儀，.17c嫩嫩草色视频蜜 %A

液質聯用儀：Exion LC™ + Triple Quad™ 4500，SCIEX

10種PFAS標（biāo）準使用液：200ng/mL，溶劑體係為（wéi）甲醇

M2PFOA和M4PFOS（內（nèi）標（biāo））使用液：1μg/mL，溶（róng）劑體係為甲醇

HLB固相萃取柱：30mg/1mL，.17c嫩嫩草色视频蜜 %A

1.2前處理過程

1.2.1樣品製備

在（zài）15mL離心管中分別加入500μL牛血清、內標（20ng/mL）50μL，pH=5.0的乙酸-乙酸銨緩衝（chōng）溶液（yè）250μL，漩渦混勻後於（yú）37℃水浴4h。

冷卻至（zhì）室溫後加入500μL乙腈，漩渦混勻，然（rán）後在10000 r/min條件下離心10min，取上清液置於20mL樣品瓶，按照圖（tú）1所示的方法進行固相（xiàng）萃取實驗。

圖1 血清中全氟化合物固相萃取流程

洗脫液在60℃條件下氮吹至近幹，加入1mL 96%甲醇進行複溶，然（rán）後過0.22μm濾（lǜ）膜轉移至樣品瓶（píng）待（dài） LC-MS/MS分析。

1.2.2加標樣品測定

取6個15mL離心管，分別加入500μL牛血清、內標（20ng/mL）和全氟化（huà）合物標準溶液（20ng/mL）各50μL，然後按照步驟1中的操作進行前處理，後得到樣（yàng）品加標溶液待LC-MS/MS分析。

1.3LC-MS/MS測（cè）定（dìng）條件

色譜柱：Shim-packVeloxC18（2.7μm，2.1*100mm）

柱溫：40℃

進樣量：10μL

流動相：A:20mmol/L乙酸銨水溶液，B:甲醇（梯度洗（xǐ）脫程序見表（biǎo）1）

流速：0.30mL/min

檢（jiǎn）測方式：多反應監測（MRM），定量、定性離子對見表2

表1 梯度洗脫程序

表2目標物的MRM選擇離子對

2、測定結果

2.1色譜圖

圖2 全氟化合物標樣色譜圖

圖3 樣品加標色譜圖

2.2加標回收率

血（xuè）清中全氟化合物經固相萃取、濃縮等前處理，LC-MS/MS檢測，得到加標回收率及重複性，具體結果見表3。

表3 血清中全氟化（huà）合物加標回（huí）收率（lǜ）結果

總（zǒng）結

本文參考（kǎo）《超高效液相色譜-四極杆/靜（jìng）電場（chǎng）軌道肼高分辨質譜法同時測定（dìng）血清中12種全氟化合物》中的方法，使用.17c嫩嫩草色视频蜜 %ASPE 1000全自動固相萃取係統和M64高通量平行濃縮儀，對牛血清中的10種全氟化合物進（jìn）行萃取和濃縮，並用液相色譜分離，電噴霧離子源（ESI）電離，多反應（yīng）監測模式（MRM）檢測。從表3可以看出，牛血清中5種全氟化合物有檢出，其中含量較高的為PFOA和PFOS，分別為0.59μg/L和0.50μg/L；10種全氟化合物的加標回收率為53.6%-117.8%，RSD為4.9%-12.1%。

.17c嫩嫩草色视频蜜 %ASPE 1000全自動固相萃取（qǔ）係統可實現多八個樣品同時上樣，具備（bèi）上樣及部分上樣兩種上樣模式，同時收集架可直接放入M64高（gāo）通（tōng）量平行濃縮儀中進行氮吹濃縮操作，中間（jiān）無需樣品轉（zhuǎn）移可提高實驗效率及減（jiǎn）少目標物損失，兩（liǎng）款儀器無本（běn）底殘留且使用方（fāng）法簡便，適用於血清中全氟化合物的檢測分析。

參考（kǎo）文獻

王錚,張濟明（míng）,郭劍秋（qiū）,等.超高效（xiào）液相色譜（pǔ）-四極杆/靜電場（chǎng）軌道肼高分辨質譜法同時測定（dìng）血清中12種全氟化合物[J].環境與職業（yè）醫學,2021,38（3）:238-244,253.